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分光光度計(jì)的類別以及應(yīng)用領(lǐng)域

2018/1/8 14:48:17 人評(píng)論 次瀏覽 標(biāo)簽:

分光光度計(jì)的類別以及應(yīng)用領(lǐng)域

1、環(huán)境溫度在條件容許的情況下,盡量保持在15-30攝氏度之間,這樣能保持電器件穩(wěn)定工作,不易老化,使分光光度計(jì)不易損壞,燈源的使用壽命得到延長(zhǎng)。若條件不容許,在高溫的情況下,縮短開(kāi)機(jī)時(shí)間,高效使用分光光度計(jì),使電器件不要長(zhǎng)期保持在高溫下。在低溫下,使預(yù)熱時(shí)間比常溫下的預(yù)熱時(shí)間要長(zhǎng),這樣能保證在儀器穩(wěn)定的情況下進(jìn)行測(cè)試。
2、環(huán)境濕度在條件容許的情況下,盡量保持在60%以下,這樣能保證光度計(jì)內(nèi)部的光學(xué)件和電器件不易受潮、腐蝕、和上霉。若條件不容許,在高濕度和低濕度的情況盡量保持通風(fēng)。
3、環(huán)境在條件容許的情況下盡量保持潔凈,打掃環(huán)境時(shí)動(dòng)作不宜太大,不要揚(yáng)起灰塵,打掃之前用防塵罩蓋上分光光度計(jì),不要讓灰塵進(jìn)入分光光度計(jì)內(nèi)部。
分光光度計(jì)有哪幾種不同的分類方式:
1.分光光度計(jì)按照波長(zhǎng)及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為:
(1)可見(jiàn)光分光光度計(jì):測(cè)定波長(zhǎng)范圍為400~760nm的可見(jiàn)光區(qū);
(2)紫外分光光度計(jì):測(cè)定波長(zhǎng)范圍為200~400nm的紫外光區(qū);
(3)紅外分光光度計(jì):測(cè)定波長(zhǎng)范圍為大于760nm的紅外光區(qū);
分光光度計(jì)最常見(jiàn)的用途和常用波長(zhǎng):
1.核酸的定量
核酸的最高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260nm。利用260nm的波長(zhǎng)可以定量測(cè)量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA的濃度。
除了核酸濃度,分光光度計(jì)同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值,用于評(píng)估樣品的純度,因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
A320檢測(cè)溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品,A320一般是0。
2.蛋白質(zhì)的直接定量
這種方法是在280nm波長(zhǎng),直接測(cè)試蛋白。選擇Warburg公式,光度計(jì)可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應(yīng)的換算方法,將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。
3.細(xì)菌細(xì)胞密度
細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中,需要采用分光光度計(jì)準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
OD600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)方法。在600nm波長(zhǎng)下,以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液,測(cè)量定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液。
(4)熒光分光光度計(jì):用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜;
(5)原子吸收分光光度計(jì):光源發(fā)出被測(cè)的特征光譜輻射,被經(jīng)過(guò)原子化器后的樣品蒸氣中的待測(cè)元素基態(tài)原子所吸收,通過(guò)測(cè)定特征輻射被吸收的大小,來(lái)求出被測(cè)元素的含量。
2.分光光度計(jì)按自動(dòng)化程度分類:可分為手動(dòng)、半自動(dòng)、自動(dòng)分光光度計(jì)
3.分光光度計(jì)按軟件可分為:帶掃描、不帶掃描。

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